細胞凋亡(apoptosis)
是一種細胞「程序性死亡(Programmed cell death)」的過程,相對於細胞壞死(necrosis),細胞凋亡是細胞主動實施的,可能為生物成長發育過程必須、生理必須或者病理因素引起,在許多生物醫學相關研究中都極為重要,也是腫瘤治療相關研究極重要的一環。
因細胞凋亡發生時,細胞的細胞膜、細胞質、粒線體及細胞核都會有相應的變化產生,也牽涉至一系列複雜的細胞因子連鎖反應,這些變化及細胞因子都可做為觀察不同時期細胞凋亡反應的重要目標。最常見用以觀察細胞凋亡的組織病理學工具,包含以下幾種:
1. TUNEL assay
2. Caspase 3
3. Annexin V
1. TUNEL assay
TUNEL (Terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labeling)分析法,用以檢測斷裂的DNA片段。DNA斷裂為細胞凋亡後期階段的特徵之一。TUNEL assy也是最廣泛被應用於觀察細胞凋亡的方法之一。
立众實驗室獨家代理的 BioTnA TUNEL試劑套組,能清晰的標示出凋亡細胞,且不會有明顯的背景訊號。
曾進行過TUNEL分析朋友們可能都有經驗,組織切片在染色完後,除了要觀察細胞的細胞核有表現外,可能很多正常組織也有大量表現,甚至連細胞質都有很多雜訊出現。BioTnA TUNEL_Kit 不僅可以有效減少背景雜訊,也有效的避免偽陽性的訊號出現。口說無憑,大家可以欣賞 立众病理實驗室使用BioTnA TUNEL Kit在小鼠腦損傷相關實驗下的大腦染色結果!
2. Caspase 3
Caspase 級聯反應 (caspase cascade)是細胞凋亡早期的重要細胞反應,其中 caspase3 在凋亡訊號傳導的許多途徑中都有重要的作用。Casepase蛋白酶除了參與核酸的剪切外,也與核纖肽(在細胞膜上)和肌動蛋白(actic, 細胞骨架的成分)的分解過程有關。也因此,Caspase 3的表現與TUNEL assay不同,Caspase 3的陽性訊號可能出現在細胞膜、細胞質及細胞核,但TUNEL僅表現於細胞核。
相較於TUNEL assay,Caspase 3表現可同時出現於細胞膜、細胞質及細胞核,如何避免染色出現過多背景雜訊,考驗實驗室的專業能力!!